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盐析沉淀法有哪些应用?

发布时间: 2025-09-30   点击量:29

盐析沉淀法的应用领域及实例

1. ‌蛋白质的初步分离与纯化

分级沉淀:通过调节硫酸铵饱和度(如30%沉淀球蛋白,50%沉淀白蛋白),实现不同蛋白质的分步分离

案例:从蛋清中分离卵清蛋白和球蛋白时,半饱和硫酸铵先沉淀球蛋白,饱和硫酸铵再沉淀卵清蛋白

优势:操作温和,可保持蛋白质天然构象和生物活性
离子浓度仪

2. ‌酶制剂的浓缩与纯化

粗提液处理:在酶粗提液中加入硫酸铵至40%饱和度,目标酶(如过氧化氢酶)沉淀,而杂蛋白仍溶解

后续纯化:沉淀经离心收集后,可结合透析或层析法进一步纯化

3. ‌工业规模生物制品生产‌               离子浓度仪

重组蛋白纯化:在发酵液中直接加入硫酸铵沉淀目标蛋白(如胰岛素),提高后续纯化效率

成本控制:盐析法成本低,适合大规模处理

4. ‌结合其他方法增强效果

等电点联用:先调节pH至目标蛋白的等电点,再盐析,可显著提高沉淀效率(如酪蛋白分离)

有机溶剂联用:盐析后使用乙醇沉淀,可提高分辨率(如DNA与蛋白质共沉淀)

5. ‌其他生物大分子分离

核酸提取:高盐浓度(如NaCl)可改变核酸溶解度,辅助DNA与蛋白质分离

多糖与脂类:盐析法也可用于多糖或脂类物质的初步分离
注意事项                            离子浓度仪

盐浓度控制:需精确计算饱和度(如硫酸铵溶解度随温度变化)

后续处理:沉淀需透析或超滤脱盐,避免残留盐分影响蛋白功能

局限性:产物纯度较低,需结合其他方法(如层析)进一步纯化

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